Agar CLED 450g

USO

El Agar CLED (por sus siglas en inglés cystine-lactose-electrolyte deficient) es utilizado para aislar, enumerar e identificación presuntiva de microorganismos en muestras de orina.

EXPLICACIÓN

Es una modificación de la fórmula desarrollada por Sandys, quien elaboró un medio deficiente en electrolitos, lo que ayudaba a evitar la formación de swarming por el género Proteus. Es un medio diferencial no selectivo utilizado para el cultivo y enumeración de microorganismos del tracto urinario. La falta de cloruro de sodio inhibe el swarming de las especies de Proteus y favorece el crecimiento de la gran mayoría de las bacterias que causan infecciones del tracto urinario. Las peptonas contenidas en el medio

proporcionan el nitrógeno, vitaminas y aminoácidos. La L-Cistina es añadida como suplemento para el crecimiento de coliformes cistina-dependientes. El azul de bromotimol es utilizado como indicador de pH y permite la diferenciación de microorganismos. Los organismos fermentadores de lactosa modifican el pH y favorecen el color del medio de verde a amarillo. El agar bacteriológico se usa como agente gelificante. Los microorganismos que causan infección en el tracto urinario son generalmente abundantes y de una sola especie. Escherichia coli es el microorganismo más frecuentemente aislado.

FÓRMULA POR LITRO

Lactosa                      10.0 g

Extracto de carne       3.0 g

Peptona de gelatina   4.0 g

Azul de bromotimol  0.02 g

L-Cistina                    0.128 g

Agar bacteriológico   15.0 g

Peptona de caseína    4.0 g

pH 7.3 ± 0.2 a 25°C

PREPARACIÓN

Suspender 36.1 gramos del medio en un litro de agua purificada. Mezclar bien y calentar con agitación suave hasta su completa disolución y hervir durante un minuto. No sobrecalentar. Esterilizar en autoclave a 121°C durante 15 minutos. Dejar enfriar a una temperatura entre 45-50°C y vaciar en placas de Petri estériles.

PROCEDIMIENTO

1. La siembra de la muestra puede hacerse por el método de dilución o por estría en la superficie del agar con un asa calibrada, de acuerdo a los procedimientos internos de laboratorio o normas aplicables. Para mejores resultados la inoculación en el medio debe ser lo más pronto posible después de la recolección de la muestra.

2. Incubar las placas a 35 ± 2°C. Contar las colonias después de 24 a 48 horas. Reportar el número de colonias/mL de muestra.