Caldo MRS para 1L (52.2g)

USO y EXPLICACIÓN

El Caldo MRS es un medio utilizado para el cultivo y enumeración de Lactobacillus spp. Tiene la misma formulación que el Agar MRS sin el agar como agente solidificante. Se emplea cuando se prefiere un medio fluido. Fue desarrollado por De Man, Rogosa y Sharpe para proporcionar un medio que permita un buen crecimiento de lactobacilos, en especial aquellas cepas como L. brevis y L. fermenti, que han mostrado un crecimiento deficiente en medios existentes. Esto se ha conseguido reemplazando el zumo de tomate del Agar Zumo de Tomate por otros nutrientes, creando un medio apto para el crecimiento de bacterias del ácido láctico, incluidos Lactobacillus, Pediococcus y Leuconostoc. El citrato de amonio a un pH bajo inhibe la mayoría de los microorganismos, pero permite el crecimiento de lactobacilos. El fosfato dipotásico y el acetato de sodio son agentes amortiguadores para mantener un pH bajo. Tween 80 es un emulsionante. Los sulfatos de manganeso y magnesio son fuentes de iones y sulfato. La peptona bacteriológica y el extracto de carne proporcionan nitrógeno, vitaminas, minerales y aminoácidos esenciales para el crecimiento. El extracto de levadura es fuente de vitaminas, particularmente del grupo B. La dextrosa es la fuente de carbono fermentable que proporciona energía. El crecimiento de algunas cepas de Lactobacillus se inhibe a un pH más alto de 6,0 y es necesario acidificar los medios para promover el crecimiento. Para acidificar los medios, se pueden agregar algunas gotas de ácido acético

FÓRMULA POR LITRO (g)

Peptona bacteriológica 10

Dextrosa 20

Fosfato dipotásico 2

Sulfato magnésico 0,2

Sulfato de manganeso 0,05

Extracto de carne 8

Acetato de sodio 5

Tween 80 1

Extracto de levadura 4

Citrato amónico 2

PREPARACIÓN

Suspender 52,25 gramos del medio en un litro de agua destilada. Mezclar bien y disolver por calentamiento agitando con frecuencia. Hervir durante un

minuto hasta disolver por completo. Dispensar en los recipientes adecuados y esterilizar en autoclave a 121 ºC durante 12 minutos.

INTRUCCIONES DE USO

- Tomar el inóculo con un asa de siembra estéril.

- Sumergir el asa en el medio y agitar suavemente.

- Incubar a 35 ºC durante 3 días o a 30 ºC durante 5 días, ambos casos en una atmósfera enriquecida con CO2.